細胞懸濁液からの培養液の精製
CELLNETTA用途事例
細胞を使った実験やバイオ医薬品の製造工程において、細胞懸濁液から培養液を精製する操作がみられます。ここでは、村田製作所で行ったHL-60細胞懸濁液から培養液を精製する方法をご紹介します。
実施方法
- ①HL-60細胞の懸濁液を作製する。※1
- ②CELLNETTAを親水化処理する。※2
- ③メッシュサイズ5 µmのCELLNETTAを遠沈管にセットする（図1操作①）。
- ④懸濁液をCELLNETTAに注ぐ（図1操作②）。
※1 細胞懸濁液の調製条件
| 細胞 | 種類 | HL-60 |
|---|---|---|
| 大きさ | 14 µm | |
| 細胞数 | 9.70× 105 cells | |
| 細胞濃度 | 1.94× 105 cells/mL | |
| 溶媒 | 種類 | RPMI培地 |
| 液量 | 5 mL |
※2 詳細は、CELLNETTAのユーザーガイド「親水化マニュアル」をご覧ください。
結果
懸濁液をCELLNETTAで処理した後の写真を図2に示します。CELLNETTAで処理後、細胞懸濁液に含まれる細胞がメッシュ上に捕捉されていることが分かります（図2-A、B）。
また、CELLNETTAを通過した懸濁液の観察結果から、HL-60細胞がすべてCELLNETTAで捕捉され、細胞懸濁液から培養液が精製されていることが分かります（表1）。
今回の結果から、CELLNETTAによる操作で、細胞懸濁液から培養液を精製できることが分かりました。
CELLNETTAを使った簡易的な方法による細胞除去は、細胞培養後の培養液精製工程や細胞培養中の培地交換工程に役立てられることが期待されます。
| 投入液 | CELLNETTA処理後の懸濁液 | ||
|---|---|---|---|
| 細胞 | 細胞数 | 9.70× 105 cells | 確認できず |
| 細胞濃度 | 1.94× 105 cells/mL | 確認できず | |
| 溶媒 | 液量 | 5 mL | 4.5 mL |
使用したCELLNETTA
| メッシュサイズ | ガンマ線照射 | 梱包数量 | 品番 |
|---|---|---|---|
| 5 µm | 有 | 1 | MZM1B005B50GA |
| 5 | MZM1B005B50GB |
注意事項
- ・本品は医療機器ではありません。
CELLNETTAの詳細情報
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- 50 ml遠沈管に適合
- 個包装
- 国内製造
- ガンマ線照射済み
| 50 ml遠沈管適合サイズ | |||
|---|---|---|---|
| メッシュサイズ（µm） | 梱包数量 | 品番 | 事例 |
| 5 | 1 | MZM1B005B50GA | 細胞懸濁液からの培養液の精製 全血・PBMCからの赤血球除去 |
| 5 | MZM1B005B50GB | ||
| 10 | 1 | MZM1B010B50GA | シングル細胞の精製 |
| 5 | MZM1B010B50GB | ||
| 15 | 1 | MZM1B015B50GA | クラスターおよびシングル細胞の分画 |
| 5 | MZM1B015B50GB | ||
| 20 | 1 | MZM1B020B50GA | クラスターおよびシングル細胞の分画 |
| 5 | MZM1B020B50GB | ||
| 100 | 1 | MZM1B100B75GA | 薬効試験におけるスフェロイドサイズの均一化 |
| 5 | MZM1B100B75GB | ||
| 200 | 1 | MZM1B200B75GA | マイクロキャリアビーズの分画 スフェロイドサイズの均一化 |
| 5 | MZM1B200B75GB | ||
※目的の細胞よりやや小さいメッシュサイズの使用を推奨しております。
用途やメッシュサイズの選定については、お気軽にお問い合わせください。
※細胞形状・流速条件等により、通過挙動は変化します。